IGFBP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421065

Visão geral

Igfbp4 codifica a proteína ligadora do fator de crescimento semelhante à insulina 4 (IGFBP4), um regulador secretado da biodisponibilidade de IGF que modula as interações de IGF1/IGF2 com os receptores de IGF e, assim, influencia a sinalização downstream de PI3K–AKT e MAPK. Em tecidos de camundongo, a IGFBP4 ajuda a moldar a proliferação, a sobrevivência e a diferenciação celulares, bem como a sinalização do microambiente extracelular, por meio do controle da atividade local de IGF. A expressão alterada de IGFBP4 tem sido associada a programas de remodelamento e inflamação em compartimentos vasculares e estromais e a mudanças em fenótipos dirigidos por fatores de crescimento relevantes para a regulação metabólica e para microambientes associados a tumores. Como um modulador dependente do contexto da sinalização mitogênica, Igfbp4 é frequentemente investigado em estudos de desenvolvimento, homeostase tecidual e mecanismos de doença que envolvem sinalização desregulada de fatores de crescimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IGFBP4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Igfbp4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Igfbp4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Igfbp4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IGFBP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Igfbp4 para a investigação da sinalização de IGFBP4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Igfbp4 críticos para a função IGFBP4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Igfbp4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IGFBP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IGFBP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Igfbp4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IGFBP4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IGFBP4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Igfbp4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Igfbp4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.