IFN-γRβ Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402794

Panoramica

IFNGR2 codifica la catena beta del recettore dell’interferone gamma (IFN-γRβ), un co-recettore essenziale che si associa a IFNGR1 per formare il complesso recettoriale funzionale per IFN-γ sulla superficie cellulare. In seguito al legame di IFN-γ, IFN-γRβ supporta l’attivazione di JAK1/JAK2 e della segnalazione a valle mediata da STAT1, promuovendo programmi trascrizionali coinvolti nell’elaborazione e presentazione dell’antigene, nell’attivazione dei macrofagi e nell’immunità antimicrobica. Questa via si interfaccia con reti immunitarie innate e adattative più ampie, plasmando le risposte infiammatorie e la sorveglianza immunitaria. Alterazioni genetiche o funzionali di IFNGR2 sono associate a una ridotta risposta a IFN-γ e a una maggiore suscettibilità a infezioni gravi, e dinamiche di segnalazione modificate sono rilevanti per studi sulla disregolazione immunitaria e sulle interazioni tra tumore e sistema immunitario.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IFN-γRβ (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IFNGR2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IFNGR2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IFNGR2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IFN-γRβ.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IFNGR2 per lo studio della segnalazione di IFN-γRβ, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IFNGR2 critici per la funzione di IFN-γRβ
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IFNGR2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IFNGR2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IFN-γRβ Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IFN-γRβ (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IFNGR2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IFNGR2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.