IFN-α4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421041
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-α4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-α4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-α4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421041 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ifna4 codifica o interferon-α4 (IFN-α4), um interferon do tipo I produzido em resposta a ácidos nucleicos virais e a outros estímulos da imunidade inata. O IFN-α4 interage com o complexo de recetores IFNAR para ativar a fosforilação de STAT1/STAT2 dependente de JAK1/TYK2 e a formação do complexo transcricional ISGF3, induzindo genes estimulados por interferon que restringem a replicação de patógenos e modulam a apresentação de antigénios. Esta sinalização molda o diálogo cruzado com as vias NF-κB e IRF, influenciando programas génicos inflamatórios, a ativação mieloide e o priming da imunidade adaptativa. A atividade desregulada de interferon do tipo I é relevante para a investigação em inflamação crónica e autoimunidade, bem como para modelos de interação hospedeiro–patógeno, nos quais o “tom” de interferon afeta a suscetibilidade à doença e a patologia tecidular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-α4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ifna4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ifna4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ifna4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-α4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ifna4 para a investigação da sinalização de IFN-α4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ifna4 críticos para a função IFN-α4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ifna4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-α4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IFN-α4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ifna4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-α4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IFN-α4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ifna4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ifna4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.