Plásmido Doble Nickase (m) IFIT1: sc-421035-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IFIT1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFIT1 (m) y el plásmido de doble nickasa IFIT1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ifit1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IFIT1 | sc-421035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IFIT1 | sc-421035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La proteína inducida por interferón con repeticiones tetratricopeptídicas 1 (IFIT1), codificada por el gen Ifit1 de ratón, es un efector clave estimulado por interferón que restringe la replicación viral al reconocer características de ARN no propio, como un caperuzado incorrecto o ARN con 5′-trifosfato, y al limitar el inicio de la traducción. IFIT1 actúa dentro de la señalización inmunitaria innata aguas abajo del interferón de tipo I y de las vías de receptores de reconocimiento de patrones, incluidas las respuestas antivirales mediadas por receptores tipo RIG-I y por TLR, moldeando el panorama transcripcional y translacional durante la infección y la inflamación. La expresión alterada de Ifit1 y la actividad de la familia IFIT se han vinculado con firmas de interferón desreguladas, la susceptibilidad del hospedador a patógenos virales y la patología mediada por el sistema inmunitario, lo que lo convierte en un nodo útil para diseccionar programas génicos dependientes de interferón en modelos murinos. Los investigadores suelen estudiar IFIT1 en contextos como respuestas al estrés impulsadas por citocinas, activación de macrófagos y células dendríticas, y la modulación de la presentación de antígenos y la comunicación cruzada entre células inmunitarias.
IFIT1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ifit1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ifit1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ifit1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ifit1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.