IDH3G Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404994-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IDH3GO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IDH3G (h) e o Plasmídeo Double Nickase IDH3G (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IDH3G. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IDH3G Anticorpo (C-5): sc-365489
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IDH3G Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IDH3G Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IDH3G codifica a subunidade gama da isocitrato desidrogenase 3 (IDH3) mitocondrial dependente de NAD, uma enzima-chave do ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) que catalisa a descarboxilação oxidativa do isocitrato em α-cetoglutarato, ao mesmo tempo que gera NADH para a fosforilação oxidativa. Ao influenciar o equilíbrio redox mitocondrial e o fluxo de carbono pelo metabolismo central, a IDH3G contribui para a homeostase energética, a anaplerose e o fornecimento de precursores biossintéticos. A perturbação da função do complexo IDH3 tem sido associada a desregulação metabólica e a alterações na respiração mitocondrial, processos frequentemente remodelados em estados celulares proliferativos e adaptados ao stress. Como um nó metabólico mitocondrial, a IDH3G é estudada no contexto da bioenergética, do controlo de espécies reativas de oxigénio e da reprogramação metabólica relevante para diversos fenótipos associados a doenças.
IDH3G O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IDH3G em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IDH3G. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IDH3G. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IDH3G interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.