Plásmido Doble Nickase (m) I830077J02Rik: sc-436641-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)I830077J02Rik consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa I830077J02Rik (m) y el plásmido de doble nickasa I830077J02Rik (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a I830077J02Rik. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) I830077J02Rik | sc-436641-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) I830077J02Rik | sc-436641-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino I830077J02Rik codifica una proteína poco caracterizada, con una anotación funcional limitada, y a menudo se considera un regulador candidato identificado mediante estudios transcriptómicos y de genómica comparada. La evidencia disponible sugiere que su papel biológico puede depender del contexto, con posibles vínculos a procesos celulares fundamentales como el control transcripcional, el metabolismo del ARN o la homeostasis proteica, que influyen en las transiciones de estado celular. Como resultado, I830077J02Rik resulta de interés para desentrañar redes génicas que moldean el desarrollo, el mantenimiento tisular y las respuestas al estrés. La expresión alterada de loci no caracterizados como I830077J02Rik se observa con frecuencia en firmas de expresión asociadas a enfermedades, lo que motiva estudios mecanísticos que conecten el genotipo con el fenotipo en modelos murinos relevantes.
I830077J02Rik El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus I830077J02Rik en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de I830077J02Rik. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de I830077J02Rik. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con I830077J02Rik alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.