Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) HPK1: sc-402367-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HPK1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HPK1 (h) y el plásmido de doble nickasa HPK1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MAP4K1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HPK1 Anticuerpo (G-9): sc-374183
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HPK1 | sc-402367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HPK1 | sc-402367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP4K1 codifica la quinasa 1 de progenitores hematopoyéticos (HPK1), una quinasa de serina/treonina de la familia Ste20 que actúa como regulador ascendente de la señalización MAPK en células inmunitarias. HPK1 transmite señales aguas abajo de los receptores de antígeno y de las vías coestimuladoras, modulando los umbrales de activación mediante la regulación de las cascadas ERK/JNK, de nodos de señalización vinculados a NF-κB y de la remodelación del citoesqueleto. Al ajustar interacciones dependientes de fosforilación entre adaptadores y redes de ubiquitina, HPK1 influye en la intensidad de la señalización del receptor de células T, en los programas de producción de citocinas y en la dinámica de la sinapsis inmunológica. La actividad alterada de MAP4K1/HPK1 se ha asociado con estados de señalización inmunitaria desregulados y se estudia con frecuencia en inmuno-oncología y en vías moleculares centradas en la inflamación.
HPK1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAP4K1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAP4K1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAP4K1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAP4K1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.