HNF-4α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400159-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HNF-4αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HNF-4α (h) e o Plasmídeo Double Nickase HNF-4α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HNF4A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HNF-4α Anticorpo (Q-15): sc-101059
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HNF-4α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HNF-4α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNF4A codifica o fator nuclear 4 alfa de hepatócitos (HNF-4α), um fator de transcrição do tipo receptor nuclear que controla programas de expressão gênica específicos de tecido no fígado, intestino, rim e ilhotas pancreáticas. O HNF-4α liga-se ao DNA como um homodímero para regular redes que governam o metabolismo de glicose e lipídios, a homeostase de ácidos biliares, o metabolismo de xenobióticos e fármacos e a diferenciação epitelial, integrando-se a outros reguladores hepáticos e endócrinos para manter a homeostase metabólica. A perturbação dos circuitos transcricionais dependentes de HNF4A está associada ao diabetes monogênico (MODY1) e a características cardiometabólicas mais amplas, e a atividade alterada de HNF-4α tem sido estudada em contextos de esteatose hepática, sinalização inflamatória e biologia de tumores epiteliais. Essas características fazem de HNF4A um nó-chave para dissecar o controle transcricional de vias metabólicas e de diferenciação em células humanas.
HNF-4α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HNF4A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HNF4A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HNF4A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HNF4A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.