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HMGI-C慢病毒激活颗粒(m) | sc-420880-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
HMGI-C慢病毒激活颗粒(m2) | sc-420880-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Hmga2 基因编码染色质结构蛋白 HMGI-C,这是一种非组蛋白因子,能够结合富含 AT 的 DNA,并通过调节增强体复合体(enhanceosome)的组装来影响转录程序,从而控制细胞增殖、谱系承诺以及发育时序。HMGI-C 与染色质重塑及转录因子网络协同作用,精细调控细胞周期进程、上皮—间质可塑性以及干/祖细胞的自我更新。Hmga2 表达失调与生长调控改变和分化状态异常相关,因此常被用作研究发育性基因调控与致癌性转录回路的关键分子节点。在小鼠模型中,Hmga2 是一种便于操控的调节因子,可用于研究伴随肿瘤转化、组织再生和细胞重编程而发生的基因组结构变化。
HMGI-C 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Hmga2 表达。
HMGI-C 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Hmga2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HMGI-C表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Hmga2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。