HMG-3/HMGB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420875

Visão geral

Hmgb3 codifica a proteína do grupo de alta mobilidade box HMGB3 (HMG-3), um fator não histónico associado à cromatina que se liga ao DNA e o dobra para modular a arquitetura dos nucleossomas e a acessibilidade do genoma. A HMGB3 participa na regulação de programas transcricionais, na replicação e reparação do DNA e na dinâmica da cromatina de ordem superior, influenciando assim a progressão do ciclo celular e a diferenciação específica de linhagens. Através das suas funções na remodelação da cromatina e em processos responsivos a danos no DNA, alterações na atividade da HMGB3 têm sido associadas a proliferação desregulada e a redes aberrantes de expressão génica hematopoiética e do desenvolvimento. Em sistemas murinos, o Hmgb3 é frequentemente estudado para dissecar o controlo epigenético de estados de células estaminais/progenitoras e as consequências moleculares de perturbações da cromatina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HMG-3/HMGB3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hmgb3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hmgb3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hmgb3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HMG-3/HMGB3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hmgb3 para a investigação da sinalização de HMG-3/HMGB3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hmgb3 críticos para a função HMG-3/HMGB3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hmgb3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HMG-3/HMGB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HMG-3/HMGB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hmgb3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HMG-3/HMGB3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HMG-3/HMGB3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hmgb3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hmgb3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.