HMG-2/HMGB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404000-NIC

HMGB2 (HMG-2) codifica uma proteína da família high mobility group box que se liga ao DNA e o dobra, modulando a estrutura da cromatina e a regulação da transcrição. HMGB2 participa da dinâmica dos nucleossomos, da comunicação entre enhancers e promotores e das respostas a danos no DNA, influenciando a progressão do ciclo celular, programas de senescência e a diferenciação específica de linhagem. Por meio de interações com fatores de transcrição e remodeladores de cromatina, ajuda a coordenar a organização do genoma durante a replicação e o reparo. A expressão desregulada de HMGB2 e sua atividade de ligação à cromatina têm sido associadas a sinalização proliferativa, instabilidade genômica e padrões alterados de expressão de genes inflamatórios relatados em múltiplos contextos de doença, incluindo estudos em biologia do câncer e degeneração tecidual.

HMG-2/HMGB2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HMGB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HMGB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HMGB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HMGB2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.