Histone Deacetylase 9 (HDAC9) Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401419-NIC

HDAC9 codifica a histona desacetilase 9, uma HDAC de classe IIa que atua como correagulador transcricional responsivo a sinais, conectando a remodelação da cromatina a estímulos ambientais. A HDAC9 transita entre o núcleo e o citoplasma e modula programas de expressão gênica por meio de complexos que contêm HDAC, afetando o equilíbrio de acetilação de histonas, a atividade de enhancers e a transcrição específica de linhagem. Ela se integra a vias controladas por fatores de transcrição da família MEF2 e a mecanismos epigenéticos mais amplos que regulam a diferenciação celular, o metabolismo e respostas ao estresse. Alterações na expressão ou na atividade de HDAC9 têm sido associadas a redes transcricionais desreguladas relevantes para a biologia cardiovascular, a função de células imunes e fenótipos oncogênicos, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de regulação epigenética.

Histone Deacetylase 9 (HDAC9) O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDAC9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDAC9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDAC9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDAC9 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.