Histone Deacetylase 7 (HDAC7) Double Nickaseプラスミド (h): sc-400989-NIC

HDAC7はヒストン脱アセチル化酵素7をコードしており、核と細胞質の間をシャトル移行するクラスIIa HDACとして、シグナル依存的にクロマチンのアクセス性と転写プログラムを制御します。HDAC7はコリプレッサー複合体の一員として機能し、カルシウム／カルモジュリン依存性キナーゼ（CaMK）シグナル伝達を統合することで、細胞分化や生存、免疫および内皮の生物学に関わる遺伝子発現を調節します。調節領域におけるアセチル化状態を制御することにより、HDAC7はMEF2関連の転写ネットワークを含む、系譜決定や炎症応答を司る経路に影響を及ぼします。HDAC7の活性や発現の異常は、がん、心血管疾患、免疫関連の病態で見られる異常なエピジェネティック制御と関連付けられており、クロマチン依存的な遺伝子制御の機構研究を支持します。

Histone Deacetylase 7 (HDAC7) ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HDAC7 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HDAC7内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HDAC7の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HDAC7が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。