Plásmido Doble Nickase (h) Histone Deacetylase 10 (HDAC10): sc-403221-NIC

HDAC10 codifica la histona desacetilasa 10, una histona desacetilasa dependiente de zinc que modula la accesibilidad de la cromatina y los programas transcripcionales al eliminar grupos acetilo de las histonas y de otros sustratos proteicos. Como desacetilasa de clase II con funciones citoplasmáticas destacadas, HDAC10 se ha vinculado a la regulación de la autofagia, las respuestas al daño del ADN y la adaptación al estrés celular, influyendo en vías que controlan la proliferación y la supervivencia. La expresión o actividad alteradas de HDAC10 se han asociado con cambios en el estado epigenético y en redes de señalización metabólicas e inmunorrelacionadas observadas en múltiples contextos patológicos, incluidos la biología del cáncer y procesos neuroinflamatorios. Estas funciones hacen de HDAC10 una diana útil para desentrañar el control epigenético de la expresión génica y sus fenotipos posteriores en modelos celulares humanos.

Histone Deacetylase 10 (HDAC10) El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HDAC10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HDAC10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HDAC10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HDAC10 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.