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HIP1双切口酶质粒(h) | sc-402515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HIP1双切口酶质粒(h2) | sc-402515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 HIP1(huntingtin interacting protein 1,亨廷顿蛋白相互作用蛋白1)编码一种内吞适配蛋白,可将网格蛋白包被小窝与肌动蛋白细胞骨架连接起来,并协调受体酪氨酸激酶及其他膜蛋白的转运。HIP1 通过其 ANTH 结构域以及与网格蛋白/AP-2 的相互作用,帮助调控生长因子受体的内化、回收与信号输出,从而影响控制增殖、生存和细胞骨架动态的通路。已有研究报道 HIP1 的表达改变或基因重排与多种癌症相关,并因其对受体周转与致癌信号传导的影响而受到关注。由于其在功能上与亨廷顿蛋白相关过程存在联系,HIP1 也在蛋白稳态与神经生物学领域被研究。
HIP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HIP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HIP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HIP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HIP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。