HGFα/β CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420849

概要

マウスHgfは肝細胞増殖因子（HGFα/β）をコードしており、上皮‐間葉系シグナル伝達を協調させるMET受容体チロシンキナーゼの分泌性ヘテロ二量体リガンドである。HGF–METの活性化は、MAPK/ERK、PI3K–AKT、STAT、Rho GTPase経路を介して、増殖、生存、運動性、形態形成、組織修復を制御する。in vivoおよびin vitroにおいて、HGFシグナルは器官の発生と再生を形作り、微小環境内の間質‐上皮間クロストークを調節する。HGF/METシグナルの異常は、線維化、炎症、がん進展（浸潤、血管新生プログラム、転移性播種を含む）のモデルで広く研究されている。

HGFα/β CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるHgf遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Hgf内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Hgfのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HGFα/βタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HGFα/βシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Hgf欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HGFα/βの機能に不可欠なHgfエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Hgfゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HGFα/β CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびHGFα/β CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Hgf遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HGFα/β HDRプラスミド（m）および HGFα/β HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHgfホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHgf標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。