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Heme Oxygenase 1/HMOX1CRISPR激活质粒(m) | sc-420882-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Heme Oxygenase 1/HMOX1CRISPR激活质粒(m2) | sc-420882-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Hmox1 编码血红素加氧酶 1(HMOX1),这是一种可诱导、对应激敏感的酶,能够催化血红素降解生成胆绿素、游离铁和一氧化碳,从而调控细胞的氧化还原平衡与铁稳态。在小鼠细胞中,HMOX1 受到氧化与亲电应激通路的强烈调控,包括 NRF2/KEAP1 信号,并与由 NF-κB 与 MAPK 级联反应主导的炎症程序发生交叉。通过限制血红素介导的促氧化活性并协同铁蛋白表达与铁的封存,HMOX1 影响线粒体功能、蛋白质稳态以及巨噬细胞极化。Hmox1 表达失调常在组织损伤、缺血-再灌注、动脉粥样硬化、神经炎症以及肿瘤微环境等研究背景中被关注,因为这些情境下氧化应激与免疫信号往往相互汇合。
Heme Oxygenase 1/HMOX1 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Hmox1的表达。
Heme Oxygenase 1/HMOX1 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Hmox1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Hmox1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Heme Oxygenase 1/HMOX1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Hmox1位点,并能够研究内源性位点上依赖于Heme Oxygenase 1/HMOX1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Hmox1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Heme Oxygenase 1/HMOX1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。