HELZ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411392-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HELZO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HELZ (h) e o Plasmídeo Double Nickase HELZ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HELZ. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HELZ Anticorpo (FA-52): sc-130438
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HELZ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411392-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HELZ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411392-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HELZ humano codifica uma proteína de ligação a RNA do tipo helicase, com motivos de dedos de zinco, que se associa a ribossomos em tradução e contribui para a regulação gênica pós-transcricional. O HELZ tem sido associado ao controle do metabolismo de mRNA, incluindo a eficiência de tradução e a degradação/turnover, bem como a programas mais amplos que governam o crescimento celular e as respostas ao estresse. Por meio de efeitos no processamento de RNA e na síntese proteica, o HELZ pode influenciar vias que moldam estados de proliferação e diferenciação. Alterações em redes de regulação de RNA envolvendo o HELZ foram observadas em contextos relevantes para a biologia tumoral e outras doenças nas quais o controle translacional está perturbado.
HELZ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HELZ em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HELZ. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HELZ. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HELZ interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.