Plasmide Double Nickase (m) Hbb-y: sc-420805-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Hbb-y correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Hbb-y Double Nickase (m) et le plasmide Hbb-y Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Hbb-y. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Hbb-y | sc-420805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Hbb-y | sc-420805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hbb-y code une sous-unité de globine de type β chez la souris, qui contribue à l’assemblage du tétramère d’hémoglobine et au transport de l’oxygène dans les cellules érythroïdes. Son expression est étroitement régulée au cours de l’érythropoïèse par les mécanismes de contrôle du locus des globines et s’intègre à la biosynthèse de l’hème, à la gestion du fer et à l’homéostasie redox afin de maintenir la fonction des globules rouges. Les variations des gènes de la β-globine perturbent la stabilité de l’hémoglobine et son affinité pour l’oxygène, offrant un cadre génétiquement exploitable pour modéliser des phénotypes liés à l’anémie et des réponses au stress des érythrocytes. Dans le cadre plus large de la voie de l’hémoglobine, Hbb-y est pertinent pour des études sur la différenciation hématopoïétique, l’adaptation à l’hypoxie et les hémoglobinopathies dans des modèles murins.
Hbb-y Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Hbb-y dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Hbb-y. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Hbb-y. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Hbb-y.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.