HARE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405069
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HARE O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HARE, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HARE Anticorpo (B-2): sc-398732
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HARE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405069 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O STAB2 codifica o receptor de hialuronano para endocitose (HARE), um receptor “scavenger” multifuncional expresso predominantemente em células endoteliais sinusoidais do fígado e em populações selecionadas da linhagem de macrófagos. O HARE medeia a captação dependente de clatrina e a depuração lisossomal do hialuronano e de diversos ligantes aniônicos, conectando a renovação da matriz extracelular à endocitose mediada por receptor e à homeostase vascular. Por meio da regulação do catabolismo do hialuronano e do tráfego de glicosaminoglicanos circulantes, o STAB2 influencia a sinalização inflamatória, a dinâmica de adesão de leucócitos e programas de remodelamento tecidual. Alterações na atividade de STAB2 têm sido associadas ao processamento desregulado do hialuronano em contextos de fibrose e doenças inflamatórias, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de biologia da matriz e de vias de depuração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HARE (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STAB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STAB2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STAB2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HARE.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STAB2 para a investigação da sinalização de HARE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STAB2 críticos para a função HARE
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STAB2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HARE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HARE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STAB2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HARE Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HARE (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STAB2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STAB2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.