GSTM5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406828

Descripción general

GSTM5 codifica la glutatión S-transferasa mu 5 (GSTM5), una enzima de desintoxicación de fase II que cataliza la conjugación del glutatión reducido con compuestos electrófilos, reforzando la defensa celular frente a xenobióticos y especies reactivas de oxígeno. Como parte de la red redox dependiente del glutatión, GSTM5 contribuye a mantener la proteostasis y a limitar el daño oxidativo en lípidos, proteínas y ADN. La variación o desregulación de la actividad de la familia GSTM se ha asociado con una susceptibilidad alterada al estrés oxidativo y a la señalización inflamatoria, procesos frecuentemente implicados en la carcinogénesis y el daño tisular. En células humanas, GSTM5 se estudia a menudo en el contexto del metabolismo de compuestos químicos, las respuestas a exposiciones ambientales y los mecanismos que determinan la homeostasis redox celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GSTM5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GSTM5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GSTM5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GSTM5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GSTM5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GSTM5 para la investigación de la señalización de GSTM5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GSTM5 críticos para la función de GSTM5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GSTM5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GSTM5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GSTM5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GSTM5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GSTM5 (h) y el plásmido HDR GSTM5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GSTM5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GSTM5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.