GRPR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401637

Visão geral

O GRPR (receptor do peptídeo liberador de gastrina) é um receptor acoplado à proteína G com sete domínios transmembrana que se liga a ligantes do tipo peptídeo liberador de gastrina/semelhantes à bombesina para regular a mobilização de cálcio intracelular e a sinalização a jusante por meio das cascatas de PLC, PKC e MAPK. A atividade do GRPR influencia a proliferação celular, a secreção e processos neuromodulatórios, associando-o a uma regulação dependente do contexto da fisiologia epitelial e neuronal. Alterações na expressão ou na sinalização do GRPR têm sido associadas a redes de sinalização oncogênica e a desregulação de vias neuroendócrinas e gastrointestinais em modelos relevantes para doenças. Como receptor de membrana com responsividade definida a ligantes, o GRPR oferece um ponto de estudo acessível para dissecar a sinalização dirigida por GPCRs, o tráfego do receptor e os desfechos transcricionais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRPR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRPR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRPR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRPR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRPR.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRPR para a investigação da sinalização de GRPR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRPR críticos para a função GRPR
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRPR para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GRPR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GRPR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRPR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GRPR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GRPR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRPR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRPR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.