Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) GROβ: sc-416416-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GROβ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GROβ Double Nickase (h) et le plasmide GROβ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CXCL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GROβ | sc-416416-NIC | 20 µg | $410.00 |
CXCL2 code la chimiokine GROβ (CXCL2), un ligand sécrété de la famille CXC qui signale principalement via CXCR2 afin de favoriser la chimiotaxie, l’adhésion et l’activation des neutrophiles ainsi que d’autres cellules myéloïdes. GROβ est induite en aval de programmes transcriptionnels inflammatoires, notamment les voies de signalisation NF-κB et MAPK, reliant la détection des agents pathogènes et les cascades de cytokines au recrutement des leucocytes. Elle contribue à façonner le microenvironnement inflammatoire local en régulant les interactions avec l’endothélium et en coordonnant le trafic des cellules de l’immunité innée. Une expression dérégulée de CXCL2/GROβ est associée à des états inflammatoires chroniques et a été étudiée dans des contextes tels que les lésions tissulaires, l’inflammation auto-immune et l’infiltration de cellules myéloïdes associées aux tumeurs.
GROβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CXCL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CXCL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CXCL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CXCL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.