Plásmido Doble Nickase (h) GPR55: sc-411265-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR55 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR55 (h) y el plásmido de doble nickasa GPR55 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPR55. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR55 | sc-411265-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GPR55 | sc-411265-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR55 codifica un receptor atípico acoplado a proteínas G que responde a ligandos derivados de lípidos y se acopla a múltiples vías de proteínas G para regular la señalización intracelular de Ca²⁺, la remodelación del citoesqueleto dependiente de RhoA/ROCK y la activación de MAPK/ERK. En células humanas, la señalización de GPR55 influye en la migración celular, la proliferación y las respuestas inflamatorias, con funciones descritas en la actividad de células inmunitarias y en el diálogo cruzado con redes relacionadas con el sistema endocannabinoide. La alteración de la expresión o la señalización de GPR55 se ha vinculado en estudios con la invasividad de células cancerosas, la señalización del dolor neuropático, la regulación metabólica y la homeostasis ósea, lo que lo convierte en una diana útil para analizar la biología de los GPCR mediada por lípidos. Estas características respaldan su uso como un nodo de vía para investigación mecanicista en farmacología de GPCR y en programas transcripcionales y fenotípicos aguas abajo.
GPR55 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPR55 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPR55. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPR55. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPR55 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.