Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GM-CSFRα Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2): sc-419841-KO-2
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GM-CSFRα Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico GM-CSFRα, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: GM-CSFRα Antibody (S-50): sc-456
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GM-CSFRα Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2) | sc-419841-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Csf2ra codifica la catena alfa del recettore del fattore stimolante le colonie di granulociti e macrofagi (GM-CSFRα), che conferisce specificità di legame per il ligando e si associa alla catena beta comune per avviare la segnalazione nelle cellule mieloidi. In seguito al legame del GM-CSF, questo complesso recettoriale attiva le vie JAK2/STAT5, MAPK/ERK e PI3K/AKT, regolando proliferazione, sopravvivenza, differenziamento e attivazione funzionale di granulociti e macrofagi. La segnalazione dipendente da GM-CSFRα influenza i programmi di citochine infiammatorie e l’omeostasi delle cellule dell’immunità innata nei tessuti ematopoietici. La disregolazione dell’asse GM-CSF è implicata nell’infiammazione immunomediata e nella disfunzione mieloide, rendendo Csf2ra un nodo rilevante per studi meccanicistici in modelli di malattie infiammatorie ed ematopoietiche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO GM-CSFRα (m2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Csf2ra in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Csf2ra insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Csf2ra a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina GM-CSFRα.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Csf2ra per lo studio della segnalazione di GM-CSFRα, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Csf2ra critici per la funzione di GM-CSFRα
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Csf2ra per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Csf2ra. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal GM-CSFRα Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR GM-CSFRα (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Csf2ra per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Csf2ra definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.