Glucagon Receptor Double Nickase Plasmid (h): sc-402018-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Glucagon Receptor Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Glucagon Receptor Double-Nickase-Plasmid (h) und Glucagon Receptor Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GCGR abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Glucagon Receptor Double Nickase Plasmid (h) | sc-402018-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glucagon Receptor Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402018-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **GCGR**-Gen kodiert den Glukagonrezeptor, einen G‑Protein-gekoppelten Rezeptor der Klasse B, der als Antwort auf Glukagon die hepatische Glukosefreisetzung und die Energiebilanz des gesamten Organismus steuert. Nach Ligandenbindung koppelt GCGR vorwiegend an **Gs**, erhöht dadurch **cAMP** und aktiviert **PKA**. Dies greift in **CREB**-abhängige Transkriptionsprogramme ein, die Glukoneogenese, Glykogenolyse und den Lipidstoffwechsel regulieren. Die GCGR-Signalübertragung ist mit der Insulin–Glukagon-Gegenregulation, der Nährstoffsensorik und der endokrinen Kontrolle der metabolischen Homöostase verknüpft. Eine fehlregulierte Aktivität des GCGR-Signalwegs wird mit für Stoffwechselerkrankungen relevanten Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter veränderte glykämische Kontrolle, gestörte hepatische Lipidverarbeitung und Dysfunktionen der endokrinen Pankreas–Leber-Achse.
Glucagon Receptor Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GCGR-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GCGR abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GCGR-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GCGR-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.