GFRα-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405061-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GFRα-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GFRα-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GFRα-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GFRA3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GFRα-3 Anticorpo (C-3): sc-398618
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GFRα-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405061-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GFRα-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405061-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GFRA3 codifica o receptor humano da família do GDNF alfa-3 (GFRα-3), um correceptor ancorado por glicosilfosfatidilinositol (GPI) que se liga à artemina e acopla o reconhecimento do ligante à sinalização da tirosina-quinase RET. Esse complexo receptor ativa, a jusante, as vias MAPK/ERK, PI3K/AKT e PLCγ, que regulam a sobrevivência neuronal, a diferenciação e o direcionamento axonal, além de contribuir para a função de neurônios sensoriais periféricos. A sinalização de GFRA3 está intimamente ligada ao controle neurotrófico da sensibilização de nociceptores e ao processamento da dor inflamatória, e alterações na sua expressão têm sido investigadas em contextos de lesão nervosa, mecanismos de dor neuropática e interações entre tumor e nervo. Como correceptor de superfície celular, o GFRα-3 oferece um ponto acessível para dissecar a dinâmica da via RET específica de ligante e a comunicação cruzada neuroimune.
GFRα-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GFRA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GFRA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GFRA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GFRA3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.