GCM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420510

概要

Gcm1 は転写因子 GCM1 をコードしており、GCM1 は DNA 結合性の調節因子として、マウス発生における胎盤の栄養膜（トロフォブラスト）分化および迷路層（ラビリンス）の形成に必須です。GCM1 は、細胞運命の決定、合胞体栄養膜（シンシチオトロフォブラスト）の形成、分岐形態形成に関わる遺伝子プログラムを制御し、細胞融合、栄養交換、血管界面の成熟を担う経路群の発現を協調的に調整します。GCM1 活性の破綻は異常な胎盤形成や胎児発育不全と関連しており、発生異常や胎盤病態生理の研究において重要です。さらに発生過程での役割に加え、GCM1 依存的な転写ネットワークは、系譜特異的な遺伝子制御を解析するための扱いやすいモデル系を提供します。

GCM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGcm1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gcm1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gcm1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GCM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GCM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gcm1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GCM1の機能に不可欠なGcm1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gcm1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GCM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGCM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gcm1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GCM1 HDRプラスミド（m）および GCM1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGcm1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGcm1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。