GATA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400134-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GATA3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GATA3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GATA3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GATA3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GATA3 Anticorpo (HG3-31): sc-268
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GATA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400134-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GATA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400134-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GATA3 codifica um fator de transcrição do tipo “zinc finger” que se liga a motivos GATA para controlar a especificação de linhagens e programas de diferenciação, com papéis de destaque no desenvolvimento de células T, na polarização Th2 e em decisões de destino celular em epitélios. Em células imunes, o GATA3 coordena a expressão de genes de citocinas e o remodelamento da cromatina para moldar a sinalização inflamatória do tipo 2, enquanto em contextos epiteliais contribui para a manutenção de estados de diferenciação por meio da regulação de redes transcricionais. A perturbação de circuitos regulados por GATA3 tem sido associada à desregulação imune e a alterações de diferenciação, tornando-o um alvo amplamente estudado no controle transcricional, na identidade celular e na expressão gênica responsiva a estímulos. Como regulador nuclear, o GATA3 é frequentemente investigado em estudos sobre uso de enhancers, cooperatividade entre fatores de transcrição e transições de estados celulares.
GATA3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GATA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GATA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GATA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GATA3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.