gamma Synuclein/SNCG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401050

Visão geral

SNCG codifica a gama-sinucleína, uma pequena proteína associada às terminações pré-sinápticas, implicada na modulação da organização do citoesqueleto, do tráfego vesicular e das respostas ao estresse celular. Em contextos não neuronais, a expressão de SNCG tem sido associada a alterações na motilidade celular e na sinalização por meio de vias que acoplam a dinâmica dos microtúbulos ao transporte de membranas e à proteostase. A desregulação da gama-sinucleína foi relatada em múltiplos tipos de tumores e é frequentemente estudada por suas associações com invasão, fenótipos relacionados à metástase e resistência ao estresse celular. Como membro da família das sinucleínas, o SNCG também fornece um modelo comparativo para investigar a biologia da agregação proteica e processos vesiculares do tipo sináptico em diversos sistemas celulares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO gamma Synuclein/SNCG (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SNCG em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SNCG, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SNCG na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína gamma Synuclein/SNCG.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SNCG para a investigação da sinalização de gamma Synuclein/SNCG, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SNCG críticos para a função gamma Synuclein/SNCG
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SNCG para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo gamma Synuclein/SNCG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo gamma Synuclein/SNCG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SNCG. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo gamma Synuclein/SNCG Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR gamma Synuclein/SNCG (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SNCG para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SNCG definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.