galectin-3 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-421416-LAC

O gene Lgals3 de camundongo codifica a galectina-3, uma lectina ligante de β-galactosídeos que regula as interações célula–célula e célula–matriz, o agrupamento de receptores dependente de glicanos e o tráfego endocítico em compartimentos imunes e estromais. A galectina-3 influencia a ativação de macrófagos, a quimiotaxia de neutrófilos e programas de fibroblastos e epiteliais ao modular processos ligados à sinalização de NF-κB, respostas a TLR, sinalização de integrina/FAK e remodelamento associado a TGF-β. Por meio de funções intracelulares no controle da apoptose e da autofagia e de funções extracelulares na adesão e em redes de citocinas, ela ajuda a moldar microambientes inflamatórios e pró-fibróticos. A expressão desregulada de Lgals3/galectina-3 é frequentemente estudada em modelos de inflamação crônica, fibrose, disfunção metabólica e regulação imune associada a tumores.

As Partículas de Ativação Lentivirais galectin-3 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Lgals3 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais galectin-3 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Lgals3, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de galectin-3. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Lgals3 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.