frizzled-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406690

概要

FZD10は、7回膜貫通型のWNT受容体であるfrizzled-10をコードしており、カノニカルなβ-カテニン依存性転写および、平面細胞極性やカルシウムフラックスを制御するノンカノニカル経路を介したシグナル伝達の調節に関与します。細胞表面での受容体—リガンド相互作用を形作ることで、frizzled-10は発生過程のパターン形成、上皮—間葉転換（EMT）関連プログラム、ならびに組織恒常性に影響を及ぼします。FZD10活性の破綻やWNT/Frizzledシグナルの変調は、がん原性シグナルネットワーク、腫瘍細胞の浸潤、異常な分化状態と関連してしばしば研究されています。FZD10はまた、WNTシグナルと増殖因子応答性の転写プログラムとのクロストークを解析するための経路ノードとしても用いられます。

frizzled-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFZD10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FZD10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FZD10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、frizzled-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、frizzled-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FZD10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• frizzled-10の機能に不可欠なFZD10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FZD10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• frizzled-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびfrizzled-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FZD10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  frizzled-10 HDRプラスミド（h）および frizzled-10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFZD10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFZD10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。