FOXK1 Plasmide Double Nickase (m): sc-421682-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXK1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXK1 Double Nickase Plasmid (m) e il FOXK1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Foxk1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXK1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421682-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXK1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421682-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene Foxk1 del topo codifica il fattore di trascrizione della famiglia forkhead box FOXK1, un regolatore associato alla cromatina che coordina programmi genici coinvolti nella differenziazione miogenica, nella progressione del ciclo cellulare e nell’adattamento metabolico. FOXK1 si integra con reti trascrizionali ed epigenetiche per modulare l’impegno e il rimodellamento della linea muscolare, influenzando vie legate all’omeostasi energetica e alle risposte allo stress. Un’attività di FOXK1 deregolata è stata studiata in contesti quali lo sviluppo del muscolo scheletrico, la capacità rigenerativa e stati proliferativi alterati, rendendolo rilevante per chiarire i meccanismi che collegano il controllo trascrizionale alla fisiologia dei tessuti. In quanto proteina nucleare legante il DNA, FOXK1 rappresenta un nodo sperimentale gestibile per mappare bersagli a valle e circuiti trascrizionali in modelli murini.
FOXK1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Foxk1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Foxk1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Foxk1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Foxk1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.