FOXF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403521

概要

FOXF1（forkhead box F1）は、発生過程における間葉系細胞のアイデンティティおよび上皮―間葉シグナル伝達を制御するフォークヘッド型転写因子をコードしており、肺および肺血管の形態形成において重要な役割を担います。FOXF1は、細胞外マトリックスの組織化、細胞移動、平滑筋／周皮細胞（ペリサイト）分化に関連する遺伝子プログラムを調節し、Hedgehog、WNT/β-カテニン、TGF-βシグナル伝達などの発生経路と統合的に機能します。FOXF1の発現量（用量）の変化や制御異常は、先天性の肺・血管異常と関連づけられており、異常な間質リモデリングや腫瘍―微小環境相互作用の文脈でも研究されています。核内でDNAに結合するタンパク質として、FOXF1は、組織パターニングと血管安定性を協調させる転写ネットワークを解明するための有用な切り口となります。

FOXF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFOXF1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FOXF1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FOXF1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FOXF1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FOXF1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FOXF1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FOXF1の機能に不可欠なFOXF1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FOXF1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FOXF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFOXF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FOXF1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FOXF1 HDRプラスミド（h）および FOXF1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFOXF1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFOXF1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。