FNIP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409140

Visão geral

FNIP2 (proteína 2 que interage com a foliculina) é um parceiro de ligação citoplasmático do supressor tumoral FLCN e atua na sinalização de detecção de nutrientes e na homeostase energética. Contribui para a regulação do eixo AMPK–mTOR e participa de processos associados aos lisossomos que conectam a disponibilidade de aminoácidos à adaptação metabólica, com efeitos a jusante sobre a autofagia e o controle do crescimento celular. Por meio de suas interações com a FLCN e complexos relacionados, a FNIP2 influencia a função mitocondrial e as respostas ao estresse em tecidos metabolicamente ativos. A desregulação da sinalização FLCN–FNIP tem sido associada a vias implicadas na predisposição hereditária a tumores e a mecanismos mais amplos de doenças metabólicas, reforçando sua relevância em estudos de crescimento celular e homeostase.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FNIP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FNIP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FNIP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FNIP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FNIP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FNIP2 para a investigação da sinalização de FNIP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FNIP2 críticos para a função FNIP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FNIP2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FNIP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FNIP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FNIP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FNIP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FNIP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FNIP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FNIP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.