FGF-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425719

概要

線維芽細胞増殖因子23（FGF-23）は、マウスのFgf23遺伝子にコードされる内分泌性FGFで、主に骨細胞および骨芽細胞で産生され、全身のリンおよびビタミンDのバランスを維持します。FGF-23はKlotho依存的にFGFRを介して作用し、腎臓でのリン再吸収を抑制するとともにビタミンD代謝を調節することで、骨リモデリングとミネラルイオン恒常性を協調させます。FGF-23シグナルの破綻は、リンの取り扱い異常、骨の石灰化障害、さらに副甲状腺ホルモンおよびビタミンD経路の二次的変化と関連しており、骨—腎臓間の内分泌クロストークにおける重要な結節点となっています。ミネラル代謝を制御し、バイオマーカーとも関連する因子として、Fgf23はリン恒常性の異常モデルや、それに関連する骨・腎生理の研究で広く解析されています。

FGF-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFgf23遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Fgf23内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Fgf23のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FGF-23タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FGF-23シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Fgf23欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FGF-23の機能に不可欠なFgf23エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Fgf23ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FGF-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFGF-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Fgf23遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FGF-23 HDRプラスミド（m）および FGF-23 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFgf23ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFgf23標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。