Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420287
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FAS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FAS Anticorpo (C236): sc-21730
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420287 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Fas codifica o FAS (CD95/APO-1), um receptor de morte da superfamília dos receptores de TNF que inicia a apoptose extrínseca quando se liga ao ligante de FAS e ocorre a subsequente formação do complexo sinalizador indutor de morte (DISC). Essa cascata de sinalização recruta FADD e ativa CASP8/CASP10, conectando-se às caspases efetoras a jusante e interagindo com a apoptose mitocondrial e com programas de sobrevivência associados ao NF-κB, dependendo do contexto celular. Na homeostase imunológica em camundongos, a morte celular induzida por ativação mediada por FAS limita a expansão de linfócitos e sustenta a tolerância periférica. A sinalização Fas/FAS desregulada está associada a apoptose defeituosa, ativação imune crônica, linfoproliferação e respostas alteradas a lesão tecidual em modelos de inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FAS (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fas em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fas, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fas na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FAS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fas para a investigação da sinalização de FAS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fas críticos para a função FAS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fas para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fas. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FAS Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FAS (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fas para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fas definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.