Plasmide Double Nickase (h) EXOD1: sc-413999-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EXOD1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EXOD1 Double Nickase (h) et le plasmide EXOD1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ERI2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EXOD1 | sc-413999-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EXOD1 | sc-413999-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERI2 code pour EXOD1, une exonucléase 3′–5′ impliquée dans le métabolisme de l’ARN et le contrôle qualité des acides nucléiques, à laquelle on attribue des rôles dans le traitement ou le renouvellement des petits ARN et d’intermédiaires d’ARN structurés. En modulant la stabilité des ARN et leur surveillance, EXOD1 s’inscrit dans des voies qui influencent la régulation post‑transcriptionnelle de l’expression génique et les réponses cellulaires aux acides nucléiques aberrants. Une dérégulation de la dégradation des ARN et des réseaux de réponse au stress associés peut affecter la stabilité du génome, la signalisation de l’immunité innée et les transitions d’état cellulaire. Par conséquent, ERI2/EXOD1 présente un intérêt pour des études mécanistiques reliant l’homéostasie des ARN au contrôle de la prolifération et à des programmes transcriptionnels associés aux maladies.
EXOD1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ERI2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ERI2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ERI2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ERI2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.