EVA1B Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-412477-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- EVA1B as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- EVA1B As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo EVA1B Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo EVA1B Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor EVA1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: EVA1B Anticorpo (D-9): sc-514783
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EVA1B Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-412477-LAC | 200 µl | $455.00 |
EVA1B (também conhecido como TMEM166L) codifica uma pequena proteína transmembranar associada ao retículo endoplasmático, implicada na regulação da autofagia e da apoptose, programas celulares que coordenam a proteostase, a adaptação ao estresse e decisões de sobrevivência. EVA1B tem sido associado ao tráfego de membranas e à homeostase de organelas, processos que se cruzam com a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e com a integridade mitocondrial. Alterações na expressão de EVA1B foram relatadas em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo fenótipos associados ao câncer e assinaturas transcricionais relacionadas à inflamação ou à neurobiologia, sustentando seu uso como marcador ou modulador em estudos de vias. Investigar EVA1B ajuda a esclarecer como a morte celular responsiva ao estresse e o fluxo autofágico contribuem para mudanças dependentes do contexto na aptidão celular e nas redes de sinalização.
As Partículas de Ativação Lentivirais EVA1B (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de EVA1B numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais EVA1B (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição EVA1B, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de EVA1B. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo EVA1B e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.