Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ERK 1 Antibody (G-12): sc-376852. Western blot analysis of ERK 1 expression in non-transfected 293T: sc-117752 (A), human ERK 1 transfected 293T: sc-171765 (B) and A-431 (C) whole cell lysates.
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ERK 1双切口酶质粒(h): sc-400010-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ERK 1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ERK 1双切酶质粒（h）和ERK 1双切酶质粒（h2）编码针对MAPK3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ERK 1: sc-271269，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ERK 1双切口酶质粒(h) | sc-400010-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERK 1双切口酶质粒(h2) | sc-400010-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK3 编码 ERK1，这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，是 RAS–RAF–MEK–ERK（MAPK）信号级联通路的核心效应分子。ERK1 在经由 MEK 依赖性磷酸化激活后，会转位进入细胞核，磷酸化转录因子及其他底物，从而调控细胞增殖、分化、细胞周期进程以及应激反应。ERK1 的活性还整合来自生长因子受体和 GPCR 通路的信号，塑造即刻早期基因的表达以及 MAPK 网络内的反馈调控。MAPK3/ERK1 信号失调与致癌信号传导、炎症生物学及神经发育过程相关，使其在研究信号网络重编程机制与细胞表型方面具有广泛意义。
ERK 1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MAPK3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAPK3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MAPK3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MAPK3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。