ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420220

概要

Erbb4は、ネuregulin（ニューレグリン）やその他のEGF様リガンドに結合して細胞間シグナル伝達を制御するEGFR/ErbBファミリーの一員である受容体型チロシンキナーゼErbB4/HER4をコードします。リガンド結合による二量体化に伴い、ErbB4はPI3K–AKT、RAS–RAF–MEK–ERK、JAK–STAT、PLCγ/PKCなどの下流カスケードを活性化し、増殖・生存・分化・遊走に関わるプログラムを形成します。マウス組織では、ErbB4は神経発生およびシナプスシグナル伝達において特に重要であり、さらに上皮や心臓の生物学においても、増殖因子に駆動されるパターニングや恒常性の維持に寄与します。ErbB4シグナルの破綻や経路間クロストークの変化は、がん関連のシグナル伝達ネットワークや神経学的表現型に関与するとされており、経路解析や遺伝子型—表現型研究の機構的ハブとしての利用を支持します。

ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるErbb4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Erbb4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Erbb4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ErbB4/HER4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ErbB4/HER4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Erbb4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ErbB4/HER4の機能に不可欠なErbb4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Erbb4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Erbb4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ErbB4/HER4 HDRプラスミド（m）および ErbB4/HER4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはErbb4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のErbb4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。