ELL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420159
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ELL O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ELL, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ELL Anticorpo (B-4): sc-398959
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ELL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420159 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ell codifica a ELL, um fator de elongação da RNA polimerase II que promove a transcrição processiva ao limitar as pausas da polimerase e apoiar a síntese produtiva de mRNA. A ELL participa de complexos regulatórios de transcrição que coordenam a elongação com o contexto da cromatina e o processamento de RNA, influenciando assim programas de expressão gênica ligados à identidade celular e à proliferação. A interrupção da elongação dependente de ELL pode alterar a fidelidade transcricional e vias de resposta ao estresse, tornando-a relevante para investigar mecanismos subjacentes à expressão gênica desregulada em redes transcricionais associadas ao câncer. Em modelos murinos, Ell oferece um ponto de entrada viável para estudar o controle da elongação ao longo do desenvolvimento, a regulação hematopoética e a dinâmica transcricional em escala genômica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ELL (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ell em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ell, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ell na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ELL.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ell para a investigação da sinalização de ELL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ell críticos para a função ELL
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ell para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ELL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ELL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ell. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ELL Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ELL (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ell para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ell definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.