Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401041-NIC

DVL3 codifica a Dishevelled 3 (Dvl-3), uma proteína adaptadora citoplasmática que transduz sinais de Wnt ao coordenar eventos próximos ao receptor a jusante de Frizzled e LRP5/6. A Dvl-3 participa tanto da regulação transcricional canônica β-catenina/TCF quanto das vias não canônicas de polaridade celular planar e Wnt/Ca²⁺, influenciando a polaridade celular, a remodelação do citoesqueleto, a migração e o padrão de desenvolvimento. Por meio dessas saídas de sinalização, DVL3 ajuda a controlar programas de proliferação e diferenciação e é frequentemente estudado em contextos em que a sinalização Wnt é reprogramada. A desregulação da sinalização dependente de DVL3 tem sido associada à ativação de vias oncogênicas, a fenótipos de invasão alterados e a mecanismos mais amplos de doenças do desenvolvimento e neurológicas ligados a um controle perturbado da via Wnt.

Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DVL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DVL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DVL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DVL3 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.