Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400571-NIC

O DVL2 codifica a Dishevelled 2 (Dvl-2), uma fosfoproteína citoplasmática que atua como um transdutor central de sinais para os recetores Frizzled nas vias Wnt. Por meio de interações proteína–proteína reguladas, a Dvl-2 coordena a sinalização Wnt/β-catenina canónica e as vias não canónicas de polaridade celular planar e Wnt/Ca²⁺, influenciando a especificação do destino celular, a polaridade, a motilidade e a organização do citoesqueleto. A atividade aberrante de DVL2 ou a reconfiguração das vias está associada à desregulação da sinalização Wnt observada em diversos cancros e fenótipos do desenvolvimento, tornando-o um nó útil para dissecar a comunicação cruzada entre vias e os resultados de sinalização específicos do contexto. O DVL2 também interage com o tráfego endocítico e com a dinâmica de plataformas (scaffolds) de sinalização, apoiando estudos mecanísticos de eventos proximais ao recetor e de programas transcricionais a jusante.

Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DVL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DVL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DVL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DVL2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.