Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400785-NIC

DVL1 codifica a Dishevelled 1 (Dvl-1), uma proteína central de andaime citoplasmático que acopla os receptores Frizzled à sinalização Wnt a jusante. Por meio de interações reguladas e fosforilação, a DVL1 coordena programas transcricionais canônicos de Wnt/β-catenina, bem como vias não canônicas de polaridade celular planar e Wnt/Ca²⁺, que moldam a dinâmica do citoesqueleto, a polaridade e a migração celular. A atividade de DVL1 influencia o padrão de desenvolvimento, o comportamento de células com características de célula-tronco e a homeostase tecidual, e a sinalização Wnt–Dishevelled aberrante é frequentemente associada à proliferação e invasão desreguladas na biologia do câncer. Essas propriedades tornam DVL1 um alvo útil para dissecar o crosstalk entre vias, a montagem do sinalossoma e saídas de Wnt específicas do contexto em células humanas.

Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DVL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DVL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DVL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DVL1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.