Plásmido Doble Nickase (h) DPPX: sc-403662-NIC

DPP6 codifica la proteína 6 similar a la dipeptidil peptidasa (DPPX), un miembro enzimáticamente inactivo de la familia DPP que actúa como subunidad auxiliar de canales de potasio dependientes de voltaje, en particular de los complejos Kv4. Al modular la compuerta del canal, su tráfico y su expresión en la superficie, DPPX configura la excitabilidad dendrítica, la repolarización del potencial de acción y la integración sináptica en las neuronas, lo que la vincula con la señalización dependiente de la actividad y la homeostasis de los circuitos neuronales. La alteración de la expresión de DPP6/DPPX o la variación genética se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, así como con la susceptibilidad a trastornos relacionados con la hiperexcitabilidad neuronal, lo que la hace relevante para estudios sobre la regulación de canales iónicos y la función cerebral.

DPPX El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DPP6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DPP6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DPP6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DPP6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.