DEK Lentiviral Activation Particles (h): sc-402862-LAC

DEK kodiert ein konserviertes, chromatinassoziiertes Phosphoprotein, das die höherstufige Chromatinarchitektur moduliert, die Nukleosomentopologie beeinflusst und an der Transkriptionskontrolle, der RNA-Prozessierung und der DNA-Replikation beteiligt ist. Es wird an Orte von DNA-Schäden rekrutiert und trägt über Effekte auf die Wahl des Reparaturwegs, Replikationsstress-Antworten und den Verlauf des Zellzyklus zur Genomstabilität bei. Über diese Aktivitäten ist DEK mit Signalwegen verknüpft, die Chromatin-Remodeling, DNA-Schadenssignalgebung und entzündliche Transkriptionsprogramme steuern. Eine veränderte DEK-Expression und eine dysregulierte Chromatinfunktion wurden mit proliferativen und stressadaptiven Phänotypen in Verbindung gebracht, die für onkologische sowie immunvermittelte Krankheitsmodelle relevant sind.

DEK Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente DEK-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

DEK Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der DEK-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen DEK-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen DEK-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.