Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
DDX46 Antibody (B-6): sc-514071. Western blot analysis of DDX46 expression in HeLa (A) and K-562 (B) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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DDX46 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-407298
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DDX46 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在DDX46基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DDX46: sc-514071，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DDX46 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-407298 | 20 µg | $397.00 |
概述
DDX46 编码一种 ATP 依赖性的 RNA 解旋酶，是剪接体中 U5 snRNP 的核心组分之一，支持前体 mRNA（pre-mRNA）剪接并维持剪接位点的准确性。DDX46 通过在剪接体组装与催化激活过程中重塑 RNA–蛋白复合物，影响转录本成熟、可变剪接程序以及下游蛋白质组构成。剪接体解旋酶活性的扰动可改变 RNA 加工网络，而这些网络参与调控细胞周期推进、DNA 损伤应答以及适应性应激相关的转录输出。包括 U5 相关因子在内的剪接机制失调，被广泛认为与肿瘤相关的转录组重编程以及神经发育和神经退行性疾病的发生机制有关，因此 DDX46 是开展 RNA 生物学研究的一个有价值节点。
DDX46 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DDX46基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DDX46基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DDX46开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使DDX46蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建DDX46缺失的细胞模型，用于DDX46信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 DDX46 功能至关重要的 DDX46 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 DDX46 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 DDX46 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 DDX46 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DDX46 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 DDX46 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 DDX46 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DDX46同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DDX46靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。