CXCR-4 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400254-LAC

Human CXCR4 kodiert CXCR-4, einen sieben-Transmembran-Chemokinrezeptor, der CXCL12/SDF-1 bindet und dadurch Chemotaxis, Zellretention und Adhäsion in hämatopoetischen und immunologischen Kompartimenten koordiniert. Die CXCR4-Signalgebung aktiviert G‑Protein-gekoppelte Signalwege einschließlich PI3K–AKT, MAPK/ERK, PLCβ‑vermitteltem Ca²⁺-Flux sowie β‑Arrestin‑abhängigem Rezeptortrafficking und prägt damit Migration, Überleben und zytoskelettale Dynamik. Eine fehlregulierte CXCR4-Aktivität wird mit aberrantem Leukozyten-Homing und inflammatorischer Signalgebung in Verbindung gebracht und häufig im Kontext von Tumorzellinvasion, Interaktionen in metastatischen Nischen und Crosstalk mit dem Mikroumfeld untersucht. Als Oberflächenrezeptor, der Chemokingradienten integriert, wird CXCR‑4 широко als funktioneller Knotenpunkt genutzt, um Migrationsassays, Rezeptorinternalisierung und nachgeschaltete transkriptionelle Programme zu untersuchen.

CXCR-4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CXCR4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CXCR-4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CXCR4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CXCR-4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CXCR4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.