Plasmide Double Nickase (m2) CTHRC1: sc-427107-NIC-2
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m2) CTHRC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CTHRC1 Double Nickase (m2) et le plasmide CTHRC1 Double Nickase (m22) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cthrc1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m2) CTHRC1 | sc-427107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Cthrc1* code CTHRC1, une protéine sécrétée associée à la matrice extracellulaire qui module le remodelage tissulaire en influençant le dépôt de collagène et les interactions cellule–matrice. CTHRC1 est fréquemment associée à la régulation des voies de signalisation Wnt, tant non canonique que canonique, avec des effets sur la migration cellulaire, la dynamique d’adhérence et les réponses vasculaires ou stromales au cours du développement et de la réparation. Des altérations de l’expression de *Cthrc1* ont été impliquées dans le remodelage fibrotique et les modifications du microenvironnement associé aux tumeurs, ce qui en fait une cible utile pour disséquer les mécanismes d’invasion, le stroma favorisant les métastases et le renouvellement pathologique de la matrice. L’édition génétique de *Cthrc1* dans des modèles murins ou des cellules en culture permet des études fonctionnelles de la signalisation de la matrice extracellulaire, de programmes de type cicatrisation et des interactions entre voies dans des contextes de remodelage induit par l’inflammation.
CTHRC1 Le plasmide double nickase (m2) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cthrc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cthrc1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cthrc1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cthrc1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.